肿瘤细胞培养方法
肿瘤细胞的特点
细胞保持永生性:自我复制
形态学:大小不一 ~ 逐渐一致
增殖力更强:DNA合成期、分裂期达50%
突变性:不同于正常细胞,失去稳定的控制高分化 变低分化
表面性状:负电荷数量>正常,贴壁性¯,抗原性可变异
成瘤性:移植到动物体内可成瘤
肿瘤细胞的培养:
与常规细胞培养技术相同。一个细胞群体,存在多种亚群,复杂性,建株细胞较正常细胞易于培养,不同亚群代表不同分化程度的细胞群表型、形态、受体、对因子的反应等均不同,不同亚群释放不同的正负调节因子 (阴阳调控)。
影响肿瘤细胞生长的因素:
原代培养:去除纤维细胞及淋巴细胞,防止细菌、真菌污染。
传代培养:增殖力低的细胞需要饲养,细胞适当密度, 基本长满后传代, *代不稳定,注意培养条件,适当调整培基。
肿瘤治疗的研究:
治疗药物敏感性的鉴定与筛选
肿瘤的多药耐药性的鉴定
各种新药治疗的实验研究
体外:肿瘤的生长(3HTdr掺入)肿瘤的杀伤率(MTT、51Cr释放)
体内:裸鼠或免疫功能抑制鼠,成瘤率、抑瘤、生长率、转移率、生存时间及死亡率作用机理的研究:基因、蛋白、酶、标志、受体
肿瘤细胞培养的应用:
肿瘤细胞的遗传特性:各种癌基因及抑癌基因的分析、染色体定位(FISH法)
肿瘤细胞的生物学行为:细胞周期(FACS)、信号传递
肿瘤细胞的标志与激素、受体变化(免疫细胞化学、放射自显影、酶免疫、荧光免疫、放射免疫、免疫印迹
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