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人胚肺细胞

人胚肺细胞

型号:HLF

更新时间:2018-11-02

简要描述:

素尔生物拥有完善的细胞库和管理体系,细胞技术20%为博士学历、40%为硕士学历,自公司成立以来,素尔细胞库携手合作单位,以每月平均近100株的量向高校、医院、研究所等提供优质细胞株细胞系。

详细介绍

人胚肺细胞培养方法:

实验材料:

1. 肺组织:取自妊娠14—18周的胎儿;

2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;

3. 消化液:0.25%胰蛋白酶(pH7.6—7.8),0.02%EDTA溶液;

4. 培养液:DMEM或RPMI1640,加10%—20%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml;

5. 保存液:10%二甲亚砜或10%甘油;

6. 眼科剪、眼科镊等无菌消毒手术器械;

7. 离心管(15ml、50ml)

实验方法:

1. 取水囊引产的妊娠3—6个月的胎儿。用75%乙醇消毒胸壁。剖胸取出两肺。剪去肺内较大的支气管后,将肺边缘组织置于平皿中,用PBS液清洗3次,除去血液。选择苍白色的肺组织,剪成1mm3 左右的碎块。再用PBS液洗2—3次,直至液体澄清为止;

2. 将肺组织块移入三角瓶中,加入5—6倍量的0.25%胰蛋白酶,密封瓶口。置4℃冰箱内消化20h;

3. 吸弃上层液体。往三角瓶中加入少量培养液,用吸管反复吹打分散细胞。稍静置,待残存的组织块下沉后,吸出细胞悬液;

4. 计数细胞,并用培养液调节细胞密度;

5. 将细胞以3×106 个/ml的密度接种于培养瓶中,于37℃、5%CO2 培养箱中培养。24h后换液,除去未贴壁的细胞及细胞碎片。以后每隔2—3d换液一次;

6. 待细胞汇合成片后,用0.25%胰蛋白酶与0.02%EDTA(1:1,V/V)混合消化液消化细胞,进行继代培养;

7. 如果要冻存细胞,以便长期使用,可以将成片细胞经消化分散后,悬浮于保存液中,调节细胞密度至1.5×106 —2.0×106 个/ml。每管1—2ml分装入冻存管,置于液氮罐中保存;

素尔生物细胞库成功培养的原代细胞如大鼠间充质干细胞、小鼠子宫平滑肌细胞、人皮肤成纤维细胞、人支气管上皮细胞、大鼠子宫内膜细胞等,具有丰富的原代细胞培养操作经验。公司实验室拥有上万种常用细胞株细胞系,包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株,如:人滑膜细胞,人胃癌细胞,人宫颈癌细胞,人肾近曲小管上皮细胞,肝癌细胞,心肌细胞,子宫内膜细胞等。可随时为你提供低价质优的细胞。

欢迎来电素尔生物021-56980388/18601675434

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