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HREC细胞培养注意事项:
1、实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。
2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
3、小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4、工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。操作过程中,应避免引起aerosol之产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。
5、定期检测下列项目:5.1CO2钢瓶之CO2压力5.2CO2培养箱之CO2浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。5.3.无菌操作台内之airflow压力,定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。6.水槽可添加消毒剂(Zephrin1:750),定期更换水槽的水
6、粉末培养基配制好后(加了血清),一般在4度尽量不要超过1个月,如在-20度存放时间可长一些,但也不要超过3-4个月,可能对于永生化细胞株来说要求不是太高,细胞娇弱,放置时间不宜过长。
7、开紫外线照射台的时候,就将培养基、酶、DHANKS液那到室外让它自然升温。这样40分钟后,温度也升上来了。有很多人将他放到37度水浴锅里加热。一定要注意水浴锅的卫生,有的常年不清洗,里面很脏,容易在外面瓶身上吸附大量细菌。因此用它的也一定要勤换水。从水浴锅拿出后,找个毛巾擦干上面的水。
HREC细胞 其他细胞:
AC16 人心肌细胞
AGS 人胃腺癌细胞
B16 小鼠黑色素瘤细胞
Bel-7402 人肝癌细胞
BIU-87 人膀胱癌细胞
C2C12 小鼠肌源性细胞
C3H10T1/2 小鼠成纤维细胞
C6 大鼠胶质瘤细胞
C666-1 人鼻咽癌细胞
C666-1.miR9 人鼻咽癌细胞
C666-1-EBNA1siRNA 人鼻咽癌细胞
C666-1-LMP1siRNA 人鼻咽癌细胞
C666-1SiNC 人鼻咽癌细胞
Caco-2 人结直肠腺癌细胞
CNE-1 人鼻咽癌细胞
CNE1-LMP1 人鼻咽癌细胞
CNE-2 人鼻咽癌细胞
HREC细胞
293 人胚肾细胞
686 喉癌细胞
2125 喉癌细胞
5867 人膀胱癌细胞
16-HBE-T 人支气管上皮细胞
293T 身上皮细胞
293T.P8 人胚肾细胞
5-8F 人鼻咽癌细胞
6-10B 人鼻咽癌细胞
7-2 蚊子细胞
A549 人肺癌细胞
A7r5 大鼠胸大动脉平滑肌细胞
cal27 人舌鳞状癌细胞
cal27.CDDP 人舌鳞状癌细胞
Capanc-2 人胰腺癌细胞
Du145 人前列腺癌细胞
Eahy.926 人脐静脉细胞融合细胞
Ec1 人食管癌细胞
Ec9706 人食管癌细胞
Eca109 人食管癌细胞
ECV304 人脐静脉内皮细胞
EJ 人膀胱癌细胞
EPC-Rabbit 兔血管内皮祖细胞
EPC-Fish 鱼上皮肿瘤细胞
FM 人口腔原代纤维母细胞
FRH0201 人胆管癌细胞
FRH0201-HCV 人胆管癌细胞
GES-1 人胃粘膜细胞
H5 人鼻咽癌细胞
H7 人鼻咽癌细胞
H9C2 大鼠心肌细胞
HaCat 人正常皮肤细胞
HCCLM3 人高转移肝癌细胞
HCT-116 人结直肠癌细胞
hct-116-GFP 人结直肠癌细胞
Hela 人宫颈癌细胞
Hep.3B2.1-7 人肝癌细胞
Hep.G2 人肝癌细胞
HepG2-ADM 人肝癌细胞
HepG2-HBX 人肝癌细胞
HK-2 人肾小管上皮细胞系
HL-7702 人肝细胞
HL-7702-TRL4siRNA 人肝细胞
HO-8910 人卵巢癌细胞
HSF 人皮肤成纤维细胞
HT-1367 人膀胱癌细胞
HT-29 人结肠癌细胞
Huh-7 人肝癌细胞
HUVEC 人脐静脉内皮细胞
iHTM 小梁细胞
J82 膀胱癌细胞
K562 人类慢性髓性白血病细胞株
LNCaP 前列腺癌细胞
lovo 人结肠癌细胞
lovo-mutPTP4A 人结肠癌细胞
M2e 人喉癌细胞
M2P2 喉癌细胞
M4C4 喉癌细胞
M4e 人喉癌细胞
MCF-7 人乳腺癌细胞
MCSs-Swine 猪骨质间充质肝细胞
MCSs-SD.Rat SD大鼠骨质间充质肝细胞
MDA-MB-231 人乳腺癌细胞
MDCK 狗肾细胞
MG63 人成骨肉瘤细胞
MHCC97-H 人肝癌细胞
MHCC97-L低转移人肝癌细胞
MKH-045 人胃腺癌细胞
MVES 肺血管内皮细胞
NIH.3T3 小鼠胚胎细胞
NP69 永生化非肿瘤人鼻咽癌上皮细胞
PANC-1 人胰腺癌细胞
PC12 大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤
PC3-Human 人前列腺癌
PC3 前列腺癌细胞
RA 病人滑膜细胞
RO 正常人滑膜细胞
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