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AML12细胞,小鼠肝细胞

AML12细胞,小鼠肝细胞

型号:

更新时间:2018-01-29

简要描述:

AML12细胞,小鼠肝细胞
素尔生物拥有完善的细胞库和管理体系,细胞技术20%为博士学历、40%为硕士学历,自公司成立以来,素尔细胞库携手合作单位,以每月平均近100株的量向高校、医院、研究所等提供优质细胞株细胞系。

详细介绍

AML12细胞,小鼠肝细胞  细胞复苏方法:

细胞原理在不加任何条件下直接冻存细胞时,AML12细胞,小鼠肝细胞 内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。细胞复苏时速度要快,使之迅速通过细胞zui易受损的-5~0℃,细胞仍能生长,活力受损不大。 目前常用的保护剂为二甲亚砜(DMSO)和甘油,它们对细胞无毒性,分子量小,溶解度大,易穿透细胞。

1.冻存 

1、消化细胞(同实验二),将 悬液收集至离心管中。 

2、1000rpm离心10分钟,弃上清液。 

3、沉淀加含保护液的培养,计数,调整至5×106/ml左右。 

4、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。 

5、将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。 

6、贴上标签,写明细胞种类,冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。 

7、按下列顺序降温:室温→4℃(20分钟〕→冰箱冷冻室(30分钟)→低温冰箱(-30℃ 1小时)→气态氮(30分钟)→液氮。  注意:操作时应小心,以免液氮冻伤。液氮定期检查,随时补充,绝对不能挥发干净,一般 30立升的液氮能用1~1.5月。 

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