THP-1细胞株

THP-1细胞株，中文名称：人单核细胞白血病细胞；单核细胞，悬浮生长。该细胞从一名1岁的患有急性单核细胞性白血病的男孩的外周血中分离建立。该细胞可以吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞，细胞膜和胞浆内均没有免疫球蛋白，表达C3R和FcR；可受佛波酯TPA诱导向单核系方向分化；可作为转染宿主。培养条件：RPMI1640+0.05mM2-硫基乙醇+10%FBS。传代方法：维持细胞浓度在2~4×105~8×105/ml，勿超过1×106/ml；2~3天换液1次。

THP-1细胞株急速的反复吹打肯定容易产生泡沫，这对细胞不利，所以我们要尽量避免。在操作时尽量选用较大口的吸管，吸液时先将吸管内空气排空，再深入液面以下吸液，吹打细胞时，尽量沿着壁吹出液体，操作轻柔，就可zui大程度避免泡沫的产生！

1.有一些细胞可以不用消化液就能够吹打下来。个人认为能不用消化液是的。譬如巨噬细胞。一直维持巨噬细胞，每次传代都不用消化液，吹打的时候一般会用瓶内未换的剩余旧培养液，这样比用新的培养基可以减少点泡沫的生成。当然这个一定要求原培养基未被污染。

2. 吹打的时候我们都知道要一点挨着一点吹，这样不会漏掉地方。而每次都会首先沿着两条对角线的方向吹打，然后再按照横着或者是竖着吹打。这样就可以比较容易把细胞吹下来，因为首先细胞的各个方向都受力了，而且比较均匀，细胞比较容易下来，而且对细胞形态的维护比较好。

3.对胶头滴管的要求。胶头滴管头部是做成弯曲45度角的形状，一般都是自己用止血钳夹住头部在酒精灯上烧弯。发现，如果吹打的时候，滴管的头部边缘如果是和吹打平面平行的话，反而容易产生泡沫，贴在底部吹，也容易产生泡沫，是能够有一个角度顺着你吹打的方向和滴管*。并且稍微远离吹打面，这样滴管内的液体容易流出，阻力会减小，就不会产生那么多的泡沫了。

4.控制吹打的节奏，急速地吹打会很快地产生泡沫，用力越大，越容易产生。是能够把握住自己的力度和节奏，有条不紊的吹打。是以自己拿滴管用手的轻松程度为准，如果刚吹几下很快就累的话，那就证明是节奏过快。吹完都不累的话那就是太慢力度也不够。一般在吹完一遍时指头发困会比较好。这样的节奏能够比较快速而且有效地完成。

本人觉得zui关键的操作是不要吹打到底。

培养细胞多年，避免THP-1细胞株气泡产生要注意以下两点：

1 吹打用的培养基不能太少，如果只有1-2mL，气泡难以避免；

2 吸管每次打出液体后立刻深入液面下吸取液体。

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密封罐  2.5L罐体可耐受高温：-50℃-140℃，密封材料：可耐受温度：-30℃-140℃，外观透明，可放置12/42支9cm培养。

密封罐  7.0L罐体可耐受高温：-50℃-140℃，密封材料：可耐受温度：-30℃-140℃，外观透明，可放置12/42支9cm培养。

密封袋    15×30cm  10条    自带密封条、可同时放4个培养基，350ml产气袋系列配套，可重复使用。

立式培养袋22×32cm  10条        自带密封条、可同时放8个培养基，2.5L产气袋系列配套，可重复使用。

厌氧产气袋2.5L  10条    用于350ml及2.5L或以上体积两种规格产品，容器内的氧气在0.5-1小时内被*吸收，同时产生等量的二氧化碳，适合厌氧菌培养。

厌氧产气袋350ml 10条   

微需氧产气袋2.5L    10条    用于350ml及2.5L或以上体积两种规格产品，药剂放入容器密封后，容器内的氧气在0.5-1小时内被吸收一半，同时产生产品等量的二氧化碳，氧气及二氧化碳的浓度变为10%左中。适合微需氧菌培养。

二氧化碳产气袋2.5L  10条    用于350ml及2.5L或以上体积两种规格产品，药剂放入容器密封后，容器内的氧气部分吸收，浓度变为15%左右，二氧化碳浓度变为6%左右，适合哮二氧化碳菌培养。

氧气指示剂  无氧状态（02＜0.1%）：浅紫色到粉红色；有氧状态（02＞0.5%）：淡蓝色到深蓝色；用于厌氧培养时检测氧气存在，可重复使用5次左右，受氧气、温度等因素影响，敏感逐渐降低

肠杆菌科(Rap.E-15)  20T     IND、MR、液体石蜡              

革兰氏阴性杆菌(KONT 20E)    20T     IND、NO3I、NO3II、VPI、VPII、TDA、液体石蜡             

非发酵菌科(Rap.N-15)    10T IND、NO3I、NO3II、液体石蜡             

葡萄球菌(Rap.S-16)  20T     NO3I、NO3II、VPI、VPII、液体石蜡               

酵母菌同化(KT-16C)  10  显色判读               

链球菌鉴定试剂（STREP)  10T VPI 、VPII                                 

衣原体检测试剂盒    20T     常温提LPS测定     

嗜酸性粒细胞染色液  3×10ml     有效期1年

过氧化物酶染色液    60ml    1   2-8℃保存，有效期6个月

铁染色液    4×25ml     有效期6个月

精子体外染液    2×25ml用于精子的体外染色、记数。有效期1年

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妇科白带涂片快速染液    4×25ml 用于妇科白带涂片等的多项快速检查。有效期1年

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快速巴氏染色液I 200ml       快速二步法：适用于阴道、子宫颈等分泌物染色

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