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A549-5Fu细胞,人肺癌细胞/5Fu耐药株

A549-5Fu细胞,人肺癌细胞/5Fu耐药株

型号:

更新时间:2016-04-06

简要描述:

A549-5Fu细胞,人肺癌细胞/5Fu耐药株素尔细胞库劲爆款:DC2.4细胞,MC38细胞,A431细胞,A561细胞,U-2 OS细胞,NCI-H520细胞,HK-2细胞,SH-SY5Y细胞,SK-N-SH细胞,HS 683细胞,T24细胞,A2780/DDP细胞,KGN细胞,MDA-MB-231细胞,KYSE30细胞,SKOV3细胞,SKOV3/DDP细胞等。

详细介绍

关键词:A549-5Fu细胞,人肺癌细胞/5Fu耐药株
产品简介:我公司主要经营ELISA试剂盒、细胞、抗体、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、其产品吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,
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产品详情:
A549-5Fu细胞,人肺癌细胞/5Fu耐药株
规格:96T/48T
保存条件:2-8℃
厂商:素尔生物
用 途:用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中人28S抗核糖体抗体(28S rRNP) 的含量。
标本的采集及保存
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不*之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
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  完全培养基:DMEM高糖培养基90%;胎牛血清10%。

  培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%

   细胞株传代方法:

  收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。 (一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个 瓶消毒后放到超菌 台内,严格无菌操作,打开血管平滑肌细胞瓶,吸出培养液,仅留下 10ml培养液在瓶内继续培养。

  (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

  1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

  2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中, 倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将 培养瓶倒转大约30 秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分 散,轻敲几下培养培养瓶, 细胞随即脱落下来。

  3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6 传代;2~3天1次。

  注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细 胞不适应而造成生长不好。

  冻存方法:冻存液:基础培养基 +5%DMSO+20%FBS

  储存:液氮储存

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