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SK-MES-1细胞价格,人肺鳞癌细胞

SK-MES-1细胞价格,人肺鳞癌细胞

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更新时间:2016-04-06

简要描述:

SK-MES-1细胞价格,人肺鳞癌细胞素尔细胞库劲爆款:DC2.4细胞,MC38细胞,A431细胞,A561细胞,U-2 OS细胞,NCI-H520细胞,HK-2细胞,SH-SY5Y细胞,SK-N-SH细胞,HS 683细胞,T24细胞,A2780/DDP细胞,KGN细胞,MDA-MB-231细胞,KYSE30细胞,SKOV3细胞,SKOV3/DDP细胞等。

详细介绍

现货供应SK-MES-1细胞价格,人肺鳞癌细胞,详细信息:
【细胞生长】:贴壁生长|悬浮生长|半贴壁半悬浮
【细胞形态】:上皮样|成纤维细胞样|多角形|球形|圆形|锁形或其它不规则形

【背景】源于一位65岁患有肺鳞状细胞癌的白人男性,自转移性胸腔积液分离而来

【培养条件】MEM+10% FBS
【规格】:5×1000000cells/瓶
【包装】:内层无菌自封袋、专用防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。
【价格】:电询/询价。
【细胞传代】:1:3 传代
【细胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【细胞检测】:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
【细胞冻存】:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)
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  的培养
【初代培养原理】
将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。
仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱(37℃)
材料:动物组织块
试剂:1640培养基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液,碘酒
【初代消化培养法】
(1)准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
(2)布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
(3)处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
(4)剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
(5)消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
(6)分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
(7)计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO23调整。
(8)培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞,纱布塞易生霉菌,每次换液时需要换新塞。
【初代组织块培养法】
《1》剪切:把组织小块置于小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污,吸静Hanks液,用眼科剪反复剪切1mm3块为止。
《2》摆布:用弯头吸管吸取若干小块,置于培养瓶中,用吸管弯头把组织小块摆布在培养瓶底部,小块相互距离以0.5cm为宜,每一25ml培养瓶底可摆布20~30块。
《3》轻轻翻转培养瓶,另瓶底向上,注意翻瓶时勿另组织小块流动,塞好瓶塞,置36.5℃温箱培养2小时左右(勿超过4小时),使小块微干涸。
《培养》从微箱中取出培养瓶,开塞,46度斜持培养瓶,箱瓶底脚部轻轻注入培养液少许,然后缓缓再把培养瓶翻转过来,让培养液慢慢覆盖附于瓶地上的组织小块。置温箱中静止培养。待细胞从组织块游出数量增多后。再补加培养液。
【传代培养法原理】
细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
【材料和试剂】
1)细胞:贴壁细胞株
2)试剂:0.25%胰酶、1640培养基(含10%小牛血清)
3)仪器和器材:倒置显微镜,培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等
【操作步骤】
1)吸除培养瓶内旧培养液。
2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。
3)置温箱中2~5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。
4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。
5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。
6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。

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