HEK293细胞，人胚肾细胞

A2780/DDP细胞用GIBCO公司RPMI1640或高糖DMEM培养基培养，补加10-12%进口优质胎牛血清和常规的双抗即可。

细胞买回去以后现扩增冻存一批保种，然后加DDP 2 mmol/L 处理10天就可以开始实验了。

细胞消化： 0.25%Trypsin + 0.02%EDTA； 细胞冻存：用10%DMSO + 90%进口血清

HCT-8/V（ VCR终浓度1µg/ml）操作说明：

HCT-8/V细胞，中文名称：HCT-8耐长春新碱结肠癌细胞。是一款生物试剂销售中心细胞库热卖产品之一，VCR终浓度1µg/ml。HCT-8/V细胞，慧颖生物用GIBCO公司RPMI1640或高糖DMEM培养基培养，补加10-12%德国SERANA*优质胎牛血清和常规的双抗即可。收到HCT-8/VCR细胞后先扩增冻存一批保种，然后在实验前用VCR终浓度1µg/ml的培养基处理细胞10天，把非耐药的细胞除掉，然后再开始实验。

HEK-293-6e细胞使用F17+L谷氨酰胺培养液，37℃ 下置于5％CO2培养箱中。待细胞融合至80％，用0．25％胰酶消化传代后接种(细胞密度5 XlO4)于培养瓶或孔板，待细胞融合至约70％后用于实验。需要设备是：摇床（提前准备）

细胞消化： 0.25%Trypsin + 0.02%EDTA； 细胞冻存：用10%DMSO + 90%血清。

产品名称：HEK293细胞，人胚肾细胞

中文名称：人胚肾细胞

生长状态：贴壁生长·悬浮生长·半贴壁半悬浮

细胞形态：多角形·上皮样·圆形·梭形·球形·不规则形

细胞背景：

培养条件：

培养条件：1：2传代

质控标准：无支原体、无细菌、无真菌、符合标准

库存状态：现货

细胞数量：500000cells/瓶

储存方法：液氮（冻存）或复苏培养。

运输方式：冻存的细胞干冰运输，复苏的细胞冰袋运输。

特惠价格：致电 （ ）

HEK293细胞，人胚肾细胞到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性，支持客户检测对应的biomarker，（如证明细胞错误，全额退款。）公司针对每株细胞，鉴定gene background，鉴定完成的细胞可以提供数据，用于证明细胞的真实性，并且帮助客户更多的了解细胞特性。

微生物及支原体检测：阴性

安全性：所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加*培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的*次传代一般是一传二。

注意事项：

1、观察细胞在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。

5、在操作计数前要将未待测悬液吹打均匀；滴入细胞悬液时盖玻片下不要出现气泡；若滴入悬液时的量太多，会使细胞悬液流入旁边的槽中。

上海试剂销售提供400多种类细胞株细胞系，20多株稳定耐药株，国产细胞，进口细胞，复苏细胞，冻存细胞，原代细胞，植物细胞，干细胞，肾脏细胞，生殖细胞，小鼠正常细胞，大鼠正常细胞等。

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Hep G2 人肝癌细胞 human hepatocellular carcinoma cell line

Hep 3B 人肝癌细胞 human hepatocellular carcinoma cell line

HL-7702 人肝细胞 human hepatocyte

BEL-7402 人肝癌细胞 human hepatocellular carcinoma cell line

HuH-7 人肝癌细胞 human hepatocellular carcinoma cell line

MHCC97-L 人低转移性肝癌细胞 human hepatocellular carcinoma cell line low metastatic potential subline

MHCC97-H 人高转移性肝癌细胞 human hepatocellular carcinoma cell line high metastatic potential subline

原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培 养；因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。不同的原代细胞传代次数不同，具体需咨询客服人员或者自行查阅 相关资料。

细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培 养细胞。从培养代数来讲，理论上可培养到40-50代。

客户应具有一定细胞培养知识与经验，并具备基本培养条件（细胞培养实验室，无菌操作台、CO2培养箱，可拍照倒置显微镜等），并按说明书要求准备好相应的无菌的培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。如果因客户缺少基本培养经验和培养条件而导致细胞死亡或污染，不在我司售后责任之内。

洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。 处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！ 1）.将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。  2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。 3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。 4）.重复步骤3再洗。 5）.重复步骤3再洗。  6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。 7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。 8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。  9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。  10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗.  11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。  以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同；若为支原体或者黑胶虫污染，基本上都是重新弄细胞了。对于黑胶虫污染，我们会预防为主。基本上德国SERANA胎牛血清、GIBCO胎牛血清中不含黑胶虫，我们建议购买！以上方法主要是针对贴壁生长的细胞，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止细胞脱落。

咨询发货周期，来源，说明书，订购流程，售后说明书，请致电客服，人结肠癌细胞，人卵巢癌细胞，人肺癌细胞，人肝癌细胞，人肾脏细胞，人胃癌细胞等热卖产品尽在试剂销售

密封罐  2.5L罐体可耐受高温：-50℃-140℃，密封材料：可耐受温度：-30℃-140℃，外观透明，可放置12/42支9cm培养。

密封罐  7.0L罐体可耐受高温：-50℃-140℃，密封材料：可耐受温度：-30℃-140℃，外观透明，可放置12/42支9cm培养。

密封袋    15×30cm  10条    自带密封条、可同时放4个培养基，350ml产气袋系列配套，可重复使用。

立式培养袋22×32cm  10条        自带密封条、可同时放8个培养基，2.5L产气袋系列配套，可重复使用。

厌氧产气袋2.5L  10条    用于350ml及2.5L或以上体积两种规格产品，容器内的氧气在0.5-1小时内被*吸收，同时产生等量的二氧化碳，适合厌氧菌培养。

厌氧产气袋350ml 10条   

微需氧产气袋2.5L    10条    用于350ml及2.5L或以上体积两种规格产品，药剂放入容器密封后，容器内的氧气在0.5-1小时内被吸收一半，同时产生产品等量的二氧化碳，氧气及二氧化碳的浓度变为10%左中。适合微需氧菌培养。

二氧化碳产气袋2.5L  10条    用于350ml及2.5L或以上体积两种规格产品，药剂放入容器密封后，容器内的氧气部分吸收，浓度变为15%左右，二氧化碳浓度变为6%左右，适合哮二氧化碳菌培养。

氧气指示剂  无氧状态（02＜0.1%）：浅紫色到粉红色；有氧状态（02＞0.5%）：淡蓝色到深蓝色；用于厌氧培养时检测氧气存在，可重复使用5次左右，受氧气、温度等因素影响，敏感逐渐降低

肠杆菌科(Rap.E-15)  20T     IND、MR、液体石蜡              

革兰氏阴性杆菌(KONT 20E)    20T     IND、NO3I、NO3II、VPI、VPII、TDA、液体石蜡             

非发酵菌科(Rap.N-15)    10T IND、NO3I、NO3II、液体石蜡             

葡萄球菌(Rap.S-16)  20T     NO3I、NO3II、VPI、VPII、液体石蜡               

酵母菌同化(KT-16C)  10  显色判读               

链球菌鉴定试剂（STREP)  10T VPI 、VPII                                 

衣原体检测试剂盒    20T     常温提LPS测定     

嗜酸性粒细胞染色液  3×10ml     有效期1年

过氧化物酶染色液    60ml    1   2-8℃保存，有效期6个月

铁染色液    4×25ml     有效期6个月

精子体外染液    2×25ml用于精子的体外染色、记数。有效期1年

精子稀释液  4×25ml 精液稀释用。有效期1年

妇科白带涂片快速染液    4×25ml 用于妇科白带涂片等的多项快速检查。有效期1年

H-E快速单一染色液   2×250ml    操作简便，一步完成，适用于妇科体验。有效期1年

苏木素-伊红染色液   2×500ml        病理组织切片良好的染色液之一。有效期1年

巴氏染色液  组      经典的病理染色液

快速巴氏染色液I 200ml       快速二步法：适用于阴道、子宫颈等分泌物染色

快速巴氏染色液II 二步法：适用于痰液、胃液等分泌物染色